Äldre är äldst

Nu kommer så äntligen en fin liten graf på de tvättar som vi i labbgruppen höll på med i påskas. Vad man ser i grafen är hur nivån koffein sjunker i supernatanten och kommer närmre och närmre de värdena som NIPen uppvisar. Efter 9 tvättar på MIPen kände vi oss tillfreds med att den var tillräckligt urtvättad med avseende på koffein.

Får, får, får?

Matlab är vår vän... ibland

se bildtext ovan

Analysgruppen tittar på småsaker

3D-bild av precipitationsMIParna i AFM. 

Ales stenar i nanoskala

Geléhallon i olika storlekar. Och tre små skrattlinjer :)

På jakt efter nålbildaren

Det är måndag den 6 maj och analysgruppen träffar ännu en gång Magnus Borgström för att undersöka var ifrån nålarna i bulk MIP:en kommer. Tre olika torra prover (1. precipitation NIP, 2. Bulk MIP och 3. Bulk NIP) löstes i aceton, pipetterades upp på ett provglas och numrerades från 1 - 3. Då kristallstrukturerna uppträdde i kanterna förra gången, valde vi att studera dessa även denna gång. Vad såg vi?

1. Precipitations NIP

2. Bulk MIP

3. Bulk NIP

Tadaa! Som Lei nämnt kommer kristallstrukturerna från koffeinet, därför syns det bara då vi tittar på MIP eftersom NIP tillverkas utan koffein. 




För att stödja vår teori kan denna färgglada bild från http://www.howtogeek.com/119345/caffeine-crystals-at-40-microns/ få synas.

40 mikrometer stora koffeinkristaller

Vågar du verkligen dricka ditt nålfyllda kaffe nu?

Protokoll från analysgruppens äventyr med Changgang

 17 / 4 - Kalibreringskurva
6 olika koffeinkoncentrationer tillreddes (0.025, 0.05, 0.1 , 0.2 , 0.4, 0.8 mM).

• 15,536 mg koffein löstes i 100 ml vatten mha magnetomrörare i 10 min, vilket gav koncentrationen 0.8 mM.
• I 5 st 2 ml mikrotuber pipeterades 1 ml vatten upp.
• 1 ml 0,8 mM hälldes i mikrotuben märkt 0,4 mM, därefter vortex mixer.
• Ur 0,4 mM koffeinkonc. togs 1 ml och hälldes i mikrotuben märkt 0,2 ml osv.
• Detta upprepades tills de 6 olika koncentrationera erhölls.
• 900 μl vatten hälldes i kuvett och placerades i spekrofotometer för kalibrering.
• Därefter undersöktes varje koncentration med spektrofotometern och en kalibreingskurva erhölls.

17/4 - Test av MIP dag 1, koffein och vattenlösning.

Förbered koffeinkoncentrationer

• Från en lösning med koncentrationen 0.8 mM tillredes 20 ml vadera av koncentrationerna 0.025 mM, 0.05 mM och 0.1 mM.

Förbered prover

• 9 olika prover för MIP och 9 olika prover för NIP förbereddes enligt schemat nedan. 

• Partiklar	conc. (2 ml)	conc. (2 ml)	conc. (2 ml)
  5 mg	0.025 mM	0.05 mM	0.1 mM
  10 mg	0.025 mM	0.05 mM	0.1 mM
  20 mg	0.025 mM	0.05 mM	0.1 mM

• Kort vortex mix per prov
• 10 min i sonic bath
• Torka av, täck med folie, på vagga kl 15.30 

18/4 - Test av MIP dag 2

Prover tas från vagga kl 13.30, efter 22 h.

• Alla prover väggs och paras ihop 2 och 2.
• Centrifiguera i 10 min i 12*1000 rpm.
• 1 ml vätska tas ut från varje prov och lämnas i nya mikrotuber.

22/ 4 - Test av MIP dag 3 - Spektofotometer

• 900 μl vatten hälldes i kuvett och placerades i spekrofotometer för kalibrering.
• Därefter undersöktes 900 μl från varje prov  med spektrofotometern och aborptionskurvor för varje partiklemängd erhölls.
• MIP järmfördes med NIP för att se skillnad i absorption av koeffein, där vi ville se en större mängd koeffein i NIP för att verifera att MIP:en fungerar.
• Nedan visas absorptionskurvan för 5 mg partiklar i koffein-vattenlösning, som ni ser gick det inte så bra.

2/5 - 3/5 - Test av MIP, koffein-acetonitril-vattenlösning (1:1)

• Samma procedur som för vattenlösningen genomfördes och nu blev resultatet bättre.
• Nedan visas absorptionskurvan för 5 mg partiklar i koffein-acetonitril-vattenlösning. Mycket bättre!

Analysgruppen kommer ikapp!

Två rejäla undersökningar med UV-sektroskopi har analysgruppen genomfört. Vi började med att göra en referenskurva för att ta reda på vilken våglängd som koffein absorberar bäst. Enligt litteraturen är det 274 nm men vi skulle se om det stämde med vår lösning och vårt instrument.

Sen kom det pyssliga. Vi hade koncentrationerna 0,025 mM, 0,05 mM och 0,1 mM blandat med 5 mg, 10 mg, respektive 20 mg, och alla versionerna både med MIP och NIP för att se om det fanns någon skillnad. Första gången var koffeinet löst i vatten och då gick det inte så himla bra. Det var ingen skillnad på MIP och NIP alls. Andra gången löstes koffeinet i hälften vatten och hälften acetonitril och det såg bättre ut! Absorptionen för NIP var högre än MIP, vilket tyder på att MIPen bundit in till mer koffein än NIPen eftersom det fanns en mindre mängd koffein kvar i vätskan.

Så kommer den stora frågan - hur ska vi få MIPen att tro att kaffe är lika bra som acetonitril?!

Äntligen färdigtvättat! (Nästan...)

Laborationsgruppen har nu, efter tio (MIP) respektive nio (NIP) tvättar uppnått bra nivåer på koffein i supernatant och har därför påbörjat en tvättprocess som innefattar två cykler med (enbart) aceton - som i övrigt är identiska med de tidigare tvättarna.
När dessa tvättar är färdiga skall proven sedan äntligen få torka!

Så fort resultaten från UV-spektroskopin blivit införda i Matlab och plottade så kommer bilder att laddas upp här på hemsidan.

Thank god it's friday

Fredag morgon och de pigga analytikerna rapporterar!
Vi var inne i renrummet och tittade på bulk-MIP-partiklarna i ljusmikroskop, dvs. de partiklarna som malts ner till småbitar efter bulkpolymerisation. Vi pipetterade ut dem i sin lösning på ett objektglas och kikade i okularet. Vad fick vi se?

Jo, en massa små prickar. Grus, sand och flagor.

 

Partiklarna är av varierande storlek och i kanterna har de lagt sig i vallar. Längst ut i kanten av den intorkade droppen har dock något hänt. Vi har fått kristallint material i långa nålar - varför? ingen aning. Vill vi ha detta i en kopp kaffe (efter Magnus påpekande att det ser ut som asbest)? ingen aning!!

Vid analysen användes förstoringarna 20 000x, 50 000x och 100 000x, där den sistnämnda var kass. Mätningar gjorde dels i dark field (bild 1) och i bright field (bild 2, 3) och med justering av ljusvinkeln mha. prismor (bild 3).

Fortsättning följer...!

Inte att förglömma vårt histogram och lognormalfördelning över partikelstorlekarna från AFM-bilderna på de magnetiska nanopartiklarna. De ser ut såhär

 

Ett besök i idéernas värld

Att leva i limbo mellan den verkliga och den virituella världen har varit mycket inspirerande och idéerna har flödat. Dock är det lite oklart om vi är fast i limbon eller faktiskt kan producera något överhuvudtaget.

Nu kommer det mycket uppdateringar från alla håll nu och det är dags för Delprojektet att ge sig lite mer tillkänna. Efter att ha tränat på att jonglera med siffror, har vi tillslut lyckats få fram allt vi vill och få ner det på papper. Det finns alltså för närvarande ett Utkast på affärsplanen för Spoonano:s första produkt. Tillsammans med en god ekonomisk prognos inklusive den maximala investeringen som krävs. Nu är alla välkommna att få sin åsikt igenom och det är fritt fram att redigera enligt de regler som finns i början av dokumentet.

Att behandla en produkt och uppskatta en marknad, både ekonomiskt och efterfrågan, är mycket abstrakt. Tankesättet är nog lika viktigt att förstå sig på för att hela tiden jobba med marknaden. 

Vi kan sammanfatta det med att vår snurra fortsätter att snurra stabilt och vi går tillbaka till balansvågen med siffrorna och jonglerar vidare.

Bildbonanza samt onsdagsuppdatering!

Protokoll, 27-28/3:
Magnet hölls mot rör och samtliga partiklar samlades där. Frågan är dock huruvida partiklarna blivit bra eller ej. Vit mjölk-aktig vätska vid sidan (om partiklar). Antagligen överblivna monomerer/initiatorer etc.

• Polymeren överförs i 20st 2ml mikrotuber, jämt fördelat viktmässigt.
• Centrifugeras 12 000 rpm i totalt 20 minuter.
• Det flytande supernatentet hälls av från tuberna.
• Varje rör fylls på med metanol och ättiksyra.
• Skakas om i vortexen och sonikeras i 10 minuter.
• Fick sedan ligga på vagga i ungefär en timme.

De fyra sista stegen upprepas sedan sex gånger.

Här kommer sedan ett antal häftiga bilder från labbet:

Påskhälsningar från AFM:et

Idag spenderades ytterliggare en heldag i Fysicums mörka källare med det lilla söta AFM:et, dock till stor del utan handledning idag eftersom vi är så duktiga. Vi lyckades skrapa ihop riktigt mycket material, så nu kan vi snart börja storleksanalysera de magnetiska nanopartiklarna på riktigt :). Vi råkade även få avbildningar av spetsen (istället för provet) som såg ut som små kycklingar, vilka vi tänkte påskhälsa med. Tyvärr kunde jag inte öppna våra bildfiler som är i JPK format, även om jag laddat ner programmet WSxM som Sofie (vår trogna doktorand) tipsat om.

Ni får istället hålla tillgodo med denna lite tidiga påskhälsning som skapats i det bästa av bildredigeringsprogram dvs. Paint.

GLAD PÅSK 

önskar 

analytikerna!

Polymerisation Across the Nation

Nu har vi i labbgruppen varit igång och labbat igen. Den här gången har det stått polymerisation på schemat. Glada pågar som vi är traskade vi till labbet klockan 10 måndag morgon. Changgang mötte upp oss glad i hågen samtidigt som han yrade någonting om att räkna om i receptet. Han hade tidigare dagar själv ställt upp experimentet för att testa så att allt skulle gå bra till. Dessutom så sa han att vi skulle två olika experiment: ett där vi gör en bulkpolymerisation och ett där vi gör en precipitationspolymerisation. Experiment 1 är således precipitation och exeperiment 2 är bulk.

Följande recept följdes:

Experiment 1

500 mg magnetic nanoparticles were added to a 40 ml mixture of acetonitrile:water (4:1) in a 50 ml borosilicate glass (?) tube equipped with a screw cap, and the mixture was then sonicated for 60 min to disperse the magnetic nanoparticles. 0,5 mmol of template (caffeine 97,10 mg), 4 mmol of MAA (0.344 mg, 0.34 ml), 8 mmol of EGDMA (1.51 ml), and initiator AIBN (50 mg) were then added to the mixture and sonicated for 5 min, and sparged with nitrogen for 5 min, and then was sealed and transferred into a (Stovall HO-10) Hybridization Oven, and kept at 60 °C for 24 h while being rotated at a speed of 20 rpm (magnetic particles will aggregate otherwise). Polymerization will take 16+ h.

Extract from tube and grind with mechanical ball grinder, then wash (3-4 days) and dry.

Protokoll (1)

• 2 50 ml teströr markerades, den ena med MIP för att den skulle innehålla templat och den andra med NIP för att den inte skulle innehålla templat.
• 0,4999 g magnetiska nanopartiklar vägdes upp och tillsattes båda teströren.
• 8 ml destillerat vatten tillsattes båda teströren.
• 32 ml acetonitril tillsattes båda teströren.
• Rören lades sedan i en sonikator i 1 timme för att lösa upp klumparna av magnetiska nanopartiklar.
• MAA plockades fram ur kylskåpet för att nå rumstemperatur.
• Till provrör MIP vägdes 97,0 mg koffein upp och tillsattes.
• Sedan adderades till båda rören 0,34 ml MAA och 2x 0,755 ml EGDMA.
• Till MIP tillsattes 50,2 mg AIBN och till NIP tillsattes 50,4 mg.
• Rören sonikerades i 5 minuter och spargades sedan med N i 5 minuter för att få bort allt syre (vilket hade minskat yielden). Locket (som hållits separata för att inte blandas ihop) sattes snabbt på och rören tätades innan de sattes in i en ugn på 60 grader kl 16.20.

Experiment 2

300 mg magnetic nanoparticles were added to a 5 ml mixture of acetonitrile:water (4:1) in a 10 ml borosilicate glass (?) tube equipped with a screw cap, and the mixture was then sonicated for 60 min to disperse the magnetic nanoparticles. 1 mmol of template (caffeine 194,19 mg), 4 mmol of MAA (0.344 mg, 0.34 ml), 20 mmol of EGDMA (3,772 ml), and initiator ABDV (86 mg) were then added to the mixture and sonicated for 5 min, and sparged with nitrogen for 5 min, and then was sealed and transferred into a (Stovall HO-10) Hybridization Oven, and kept at 60 °C for 24 h while being rotated at a speed of 20 rpm (magnetic particles will aggregate otherwise). Polymerization will take 16+ h.

Protokoll (2)

• De magnetiska partiklarna maldes för hand under det här experimentet för att det inte skulle behöva stå lika länge i sonifikatorn.
• 0,3001 g av de magnetiska partiklarna tillsattes 2 stycken 10 ml provrör, det ena märkt med MIP och det andra med NIP.
• 1 ml destillerat vatten tillsattes båda rören.
• 4 ml acetonitril tillsattes båda rören.
• Rören sattes sedan ner i en sonifkator för att de magnetiska partiklarna skulle lösas upp.
• 194,4 mg koffein vägdes upp och tillsattes i MIP-röret.
• 0,34 ml MAA samt 3x1+1x0,772 ml EGDMA tillsattes båda rören.
• 85,9 mg ABDV vägdes och tillsattes båda provrören.
• Rören sofikerades i fem minuter och spargades sedan 5 minuter med N.
• In i samma ugn som ovan kl 16.00. Hade polymeriserat redan en halvtimme efteråt.

AFM: Första titten på de magnetiska nanopartiklarna

Även analysgruppen har kommit igång med sitt praktiska arbete. Eftersom labbgruppen så duktigt tagit fram en hög med  magnetiska nanopartiklar, kunde analytikterna börja sitt detektivarbete. Vi besökte doktoranden Sofie Yngman och ett litet ensamt AFM i Fysicums mörka källare. Då partiklarna klumpat  ihop sig fick vi, efter några misslyckade försök att titta på dem i AMF:et, lösa upp dem i etanol och sonic-bath:a dem i 5 min. En droppe applicerades på ett kiselsubstrat och intorkning inväntades.

Fina bilder som den ovan kunde sedan tas och vi uppmärksammade partiklarnas något skumma storleksfördelning. 5 nm höga och 50 nm breda, hade vi gjort nanomynt? Det möjliga felet i bredd kan bero på att AFM spetsen är 30 nm bred, vidare forskning görs.

Detektivarbetet fortsätter tisdagsmorgonen den 26/3, vilket förhoppningsvis ger oss nytt och fint material att analysera.

Ute i verkligheten med Spoonano

Efter en dags skrivande bestämde sig affärsnissarna för att ge sig ut i verkligheten och se hur den såg ut. De små trollen tog sig ända bort till centrum av Lund, för att fråga vad de tycker om decaf och om det behövs ett alternativ till dagens bönor.

Det visade sig att de två stora kedjorna i Lund, Waynes Coffee och Espressohouse, säljer decaf men inte skyltar om det direkt. De säljer det troligen bara på förfrågan till samma pris som en vanlig kaffe. Förfrågan fick de bara någongång i månaden. Av den anledningen har Café Nesta valt att inte sälja det alls då de anser att kaffet hinner bli dåligt innan de hinner omsätta en förpackning.

Men Café Nesta och även Tehuset i Lund var mycket intresserade av en produkt som kunde ta bort koffeinet på plats från en bryggd kopp kaffe. De tyckte det verkade lite konstigt men poängterade att det vore bra emd en metod som endast kunde ta bort koffeinet till en billig peng per kopp. De var till och med intresserade av att testa en produkt om det nu skulle bli någon sådan(en test version då).

Även kul information är att fler och fler efterfrågar decaf, både på caféer och hos kaffeförsäljare. Detta tros vara på grund av läkarrekomendationer vid hjälrtproblem och liknande. Istället har butikerna fått utöka sitt sortiment av rooibos teer som är helt fria från koffein. Den markanden tros har blivit så stor med tanke på att fler och fler efterfrågar decaf. Det enda decaf kaffet som säljs på Tehuset i Lund är ett colombianskt kaffe som kostar 79kronor för 250g bönor.

Marknaden ser lovande ut och vill vi är det bara att fortsätta.
Historien slutade förresten med att det ena trollet köpte en falafel på Lunda Falafel och gick hem.

Jakten på det försvunna företaget

Eftersom alla grupper utom en har synts på bloggen så ska inte vi vara sämre. Som ni kanske vet så ska vi försöka skriva en affärsplan angående enkel borttagning av koffein ur en kopp kaffe. Vi har lyckats ta fram vår produktidé tillsammans med gruppen under förra mötet. Nu är det bara att sätta igång med marknades undersökningen som behövs och lite marknadsföring.

Detta är något som tydligen redan gjorts för länge sedan borta i det stora landet America, där de passade på att patentera metoden också. Men efter 2007 finns ingen dokumentation what-so-ever om företaget Decaf Company. Så ett detektivarbete har inletts för att veta om det finns produkter(som inte heller går att hitta) samt någon kontaktperson över huvud taget. Det kan vara en hype för att få VC och sedan har det bara dött ut. Vi har kontakt med Anton Frisk som har gjort en likadan sökning som vi för något år sedan och han mötte också en återvädsgränd.

Men patentet är ju inte något som hindrar oss i Europa även om marknaden är markant mindre i Europa.
 Arbetet kommer att fortsätta under dagen och uppdatering kommer att ske så fort skatten är funnen!

Tillverkning av järnpartiklar

Idag har labbgruppen haft sin första laboration och nu står våra magnetiska (!!) partiklar på tork.

Processen påbörjades 0900 och blev just färdig, men då hade vi en lucka på tre timmar under dagen. Vi höll hus i Kemicentrum, tillämpad biokemi, i Changgangs labbsal/kontor, där vi kommer hålla hus en del i framtiden.

Imorgon eftermiddag kommer Anders och Fredrik att återbesöka labbsalen för att hämta upp det torra provet så att en delmängd kan ges till karakteriseringsgruppen.

Bilder/film kommer upp på hemsidan inom en snar framtid.

Receptet vi följde:

Briefly, FeCL3 (7.30 g) and FeSO4 * 7 H2O (8.35 g) were dissolved in 100 mL of water and heat to 80 deg C. Ammonium hydroxide (30 mL) was then added. To improve the stability of the particle dispersion, a small amount of oleic acid (2 mL) was also added, resulting in the formation of oleic acid-coated magnetic particles. The reaction was allowed to last for 3 h under constant stirring, before the Fe3O4 nanoparticles formed were collected using a magnet. The Fe3O4 nanoparticles were washed thoroughly with ethanol (95 %) and distilled water, and then dried under vacuum overnight.

Protokoll 13/2 2013:

• 7,44 g FeCl3 mättes upp och hälldes i en E-kolv.
• 8,3517 g FeSO4.6H20 mättes upp och hälldes i samma E-kolv.
• 100 ml destillerat vatten tillsattes för att lösa upp de två järnpulverna. En exoterm reaktion registrerades då kolven blev varm.
• Lösningen av järnsalter påskyndades genom magnetisk omrörning (inga problem då inga magnetiska egenskaper hittills skapats) under ca 6 minuter.
• Lösningen värmdes i oljebad till 81 grader eftersom reaktionen går snabbare vid högre temperatur (magnetloppan var uttagen). Vid uppnådd temperatur tillsattes 30 ml ammoniumhydroxid samt 2 ml fettsyra. Hydroxidgrupperna är de som interagerar med järnet.
• En omrörare (352 rpm) användes för att röra om lösningen under konstant temperatur i 3 timmar.
• Efter omrörning rengjordes provet i tre omgångar. 
• 200 ml methanol tillsattes och hela kolven skakades för att röra om. Genom att sedan hålla en magnet mot botten av kolven kunde vätskan hällas ut och partiklarna hållas kvar. Detta gjordes 3 gånger.
• 200 ml destillerat vatten tillsattes och sedan utfördes samma procedur som ovan, upprepades 4 gånger.
• 50 ml methanol tillsattes en sista gång för att få en vätska som snabbt avdunstar innan man lägger in kolven i vakuumpumpen.
• Kolven lades in vakuumkammaren och vakuum pumpades. Eftersom det fortfarande var lite vätska kvar började detta att "koka" och slabba lite.
• Allting lämnas för att låta torka till imorgon eftermiddag.

Tisdagstankar under hängmattan

Nu har analysgruppen haft sammanträde under en hängmatta på luddig bas (matta). En mycket fin mind-map blev resultatet och vi har kommit fram till att vi inte ska komma på fler saker utan istället satsa så mycket som möjligt på dessa karakteriseringsmetoder. Bilden är jättetydlig och bildtext är därför överflödig.

Oklarheter ligger framförallt i hur och om vi ska mäta magnetismen, samt om och varför vi ska använda SEM. Detta ska utredas med gediget detektivarbete under fredagen som stundar. Kanske ett möte med någon annan insyltad person som kan lite mer än vi (eller tror sig kunna..) kan vara på sin plats.

Älskade tisdagsmöte

Så sitter vi här igen, i matteannexet hela tisdagen. Idag har vi i och för sig placerat oss på nedanvåningen för att få vårsolen i ögonen och slippa se datorskärmarna. Axel stod för fikaansvaret och bjöd på citron- och vallmomuffins som smakade delikat av citrus och opium. Nu framåt eftermiddagen sitter vi och skriver recept på magnetiska nanopartiklar och koffeinMIPar på ena sidan bordet, medan andra sidan diskuterar marknadsapproach i affärsplanen. Vad är sanning och vad är visioner och hur skiljer mam dem från rent bullshit? Och finns det patent på skedarna vi vill göra? Något som är säkert är att det blir en spännande fortsättning på fredag när vi ska träffa Lei och planera den första labben!

Malin och Karin sitter också och myser med ett godkänt svar från Lei om att TEMma magnetisla partiklar, det är bara Reine som ska lindas runt lillfingret ;)

Möte med Lars Montelius

Förberedning respektive själva mötet!

Teambuilding

Det är måndag och alla i Blood brothers har sammanstrålat i Axels hydda i långtbortombron för att ha teambuilding. Blodröda rödbetsbiffar med en konsistens lik solvarm tång i havsbrynet med goda tillbehör och desto bättre sällskap. - Ska man på middag så tar man med sig något gott och jag hade hallon i frysen, säger Fredrik. De gjorde susen på toppen av den goda efterrätten. 

Nu går vi igenom punkter på en lista... en lång lista men den hade halvtid så den borde ju hakunna ta slut. Eller också går diskussionen i valfri riktning - hästar, kiwi, vernissage, min hund och min mamma!

Möte med Lei

Spännande möte med Master Lei